Inserm, Institut national de la santé et de la recherche médicale
Faculté de pharmacie, Aix Marseille Université

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Plateforme AMUTICYT

Cytométrie en flux, microscopie à épifluorescence, cytofluorimétrie, photométrie

Responsable plateforme : Stéphane Robert.

Instruments disponibles

  • Cytomètre Analyseur Gallios 3 lasers 10 couleurs
  • Microscope à épifluorescence Nikon TE2000U
  • Microscope à épifluorescence Leica DMI8
  • Cytofluor 4000 Perseptive Pallied Biosystems
  • Multiskan Ascent 96 Plate reader
  • Attune NXT avec passeur de plaques, 4 lasers 14 couleurs

Principaux protocoles proposés

  • Caractérisation et numération des microparticules humaines circulantes
  • Caractérisation et numération des progéniteurs endothéliaux circulants
  • Dosage des cytokines en cytométrie de flux (méthode CBA)
  • Etude du cycle cellulaire
  • Etude de l’apoptose cellulaire (marquage Annexine V-/7-AAD)
  • Aide à la création de panel de multi-marquage cellulaire sur demande

Analyse et retraitement de données cytométriques

  • Ordinateur de retraitement et logiciel de réanalyse Kaluza (Beckman Coulter) disponible sur site

Disponibilité interne et externe

  • Cytomètre Analyseur Gallios 3 lasers 10 couleurs :oui/sur projet avec accord du directeur de l’unité
  • Microscope à épifluorescence Nikon TE2000U : oui/sur projet avec accord du directeur de l’unité
  • Microscope à épifluorescence Leica DMI8:oui/non disponible en externe
  • Cytofluor 4000 Perseptive Pallied Biosystems : oui/sur projet avec accord du directeur de l’unité
  • -Multiskan Ascent 96 Plate reader : oui/sur projet avec accord du directeur de l’unité

Pour l’utilisation externe du cytomètre , une participation financière aux consommables communs (liquide de gaine/tubes d’analyse) pourra être demandée en fonction de la taille du projet.

Méthode de réservation

Agenda électronique pour chaque appareil disponible sur l’intranet du site web de l’unité.

Pour les projets externes, session utilisateur et mot de passe fournis lors du démarrage du projet.

Formations proposées

Formation cytométrie en flux générale :

  • Durée de la formation 3 jours
  • Sessions de formation : 2/an (septembre-octobre et janvier/fevrier)
  • En interne. Pour les externes, sur demande après accord du directeur d’unité.

Contenu :

  • Bases théoriques de la cytométrie en flux. Principes de fonctionnement.
  • Rappel de certains concepts d’immunotechnologies
  • Analyse multiparamétrique : intérêt et contraintes associées.

Pratique :

  • Prise en main de l’instrument. Condition d’utilisations. Découverte du logiciel d’acquisition
  • Création de protocoles et de suite de protocoles
  • Réglages de l’instrument. Mise en place d’une analyse mulicouleur

Analyse de données :

  • Exploitation des capacités de retraitement du logiciel d’acquisition
  • Découverte et prise en main du logiciel de retraitement Kaluza (Beckman coulter)

Formation cytométrie en flux : application microparticules

  • Sur demande et en interne uniquement. Formation en externe prochainement disponible

Formation microscope à fluorescence

  • Disponible en interne. Formation en Février : 1 journée . En externe, sur demande après accord du directeur d’unité.
  • Objectif de la formation : prise en main et utilisation autonome du Leica DMI8 et de ces modules (y compris le live imaging) ainsi que le logiciel LASX